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介紹胰島素ELISA試劑盒及操作注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2023-03-07   點(diǎn)擊次數(shù):1525次

胰島素ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。

  

什么是胰島素?

胰島素是由胰臟內(nèi)的胰島β細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。胰島素是機(jī)體內(nèi)降低血糖的激素,同時(shí)促進(jìn)糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成。外源性胰島素主要用來(lái)治療糖尿病。


胰島素的生物合成速度受血漿葡萄糖濃度的影響,當(dāng)血糖濃度升高時(shí),β細(xì)胞中胰島素原含量增加,胰島素合成加速。


胰島素在胰島β細(xì)胞中合成。胰島素的分子量5700,由兩條氨基酸肽鏈組成。A鏈有21個(gè)氨基酸,B鏈有30個(gè)氨基酸。A-B鏈之間有兩處二硫鍵相連。

  

胰島素ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):

1、試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶溶解后再使用。

2、實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

3、濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋?zhuān)苯尤?0μL加樣即可。

4、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5、所有液體組分使用前充分搖勻。

  

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