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本試劑僅供研究使用  標(biāo)本：體液

試驗(yàn)原理：

S100-β試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知S100-β濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將S100-β和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中S100-β的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

1． 蒸餾水。

2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3． ELISA檢測試劑盒不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項(xiàng)

1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

9． 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

1、 血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

1． 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟

1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。

4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。

8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限

6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能

1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

結(jié) 果 判 斷 與 分 析

1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），ELISA檢測試劑盒相應(yīng)的S100-β標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的S100-β含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

3、檢測值范圍：0-40ng/ml

4、敏感度： 0.1 ng/ml

L-Selectin/CD62L ELISA Kit  小鼠L選擇素 X17969  96T
Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit  豚鼠卵清蛋白特異性IgG X17970  96T
ACV-RAb（Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb ）ELISA Kit  大鼠活化素A受體抗體 X17971  96T
IL-1 Beta （Rabbit Interleukin 1 Beta） ELISA Kit  兔白介素1β X17972  96T
PCDH1（ Human protocadherin 1,PCDH1 ）ELISA Kit  人原鈣黏素1 X17973  96T
CK-MB（Rat Creatine Kinase MB isoenzyme） ELISA Kit  大鼠肌酸激酶同工酶MB ELISA Kit X17974  96T
SCT（Salmon calcitonin） ELISA Kit  鮭魚降鈣素 X17975  96T
IL-6 （Rabbit Interleukin 6） ELISA Kit  兔白介素6 X17976  96T
Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit   豚鼠白介素4 X17977  96T
NGB（Rat Neuroglobin,NGB） ELISA Kit  大鼠腦紅蛋白 X17978  96T
PCDH1（Human Interleukin-2 receptor,IL-2R） ELISA Kit  人原鈣黏素1 X17979  96T
Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit  小鼠粘蛋白/粘液素5B X17980  96T
IL-10 （Rabbit Interleukin 10） ELISA Kit  兔白介素10 X17981  96T
CTACK/CCL27（Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK） ELISA Kit  人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子 X17982  96T
Guinea pig Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit  豚鼠免疫球蛋白G X17983  96T
TPO（Rat Thrombopoietin,TPO ）ELISA kit  大鼠血小板生成素 X17984  96T
Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit   小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 X17985  96T
IFN- Gamma ELISA Kit（mouse）   小鼠γ干擾素 X17986  96T
FSH Poultry ELISA Kit  FSH 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 X17987  96T
LH Poultry ELISA Kit   LH 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 X17988  96T
PRL Poultry ELISA Kit  PRL 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 X17989  96T
E2 ELISA KIT  魚雌二醇 X17990  96T