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干細胞分化命運的新理論
更新時間:2015-05-11   點擊次數(shù):1001次

   zui近,前列腺素E2作為臍帶血移植藥物,在不同器官中,前列腺素可能是細胞生長的主要調(diào)控因子,知道它可以用于臍帶血移植,也能夠在肝臟中起作用,那么很可能前列腺素還能影響更多的其他器官。

    發(fā)現(xiàn)在干細胞分化形成內(nèi)臟的區(qū)域中,前列腺素E2的含量存在一個梯度。當時已知藥物對斑馬魚胚胎進行化學篩選,以尋找能夠令造血干細胞增多的化合物。發(fā)現(xiàn)前列腺素E2的效果,它是*被發(fā)現(xiàn)有此效果的分子。肝臟和胰腺來源于共同的內(nèi)胚層前體細胞。

1 細菌的生長狀態(tài):實驗中應(yīng)密切注視細菌的生長狀態(tài)和密度,盡量使用對數(shù)生長期的細胞(一般通過檢測OD600來控制。DH5?菌株OD600為0.5時細胞密度是5×107/ml);

2 所有操作均應(yīng)在無菌條件和冰上進行;

3 經(jīng)CaCl2處理的細胞,在低溫條件下,一定的時間內(nèi)轉(zhuǎn)化率隨時間的推移而增加,24小時達到zui高,之后轉(zhuǎn)化率再下降(這是由于總的活菌數(shù)隨時間延長而減少造成的);

4 化合物及無機離子的影響:在Ca2 的基礎(chǔ)上聯(lián)合其他二價金屬離子(如Mn2 或Co2 )、DMSO或還原劑等物質(zhì)處理細菌,可使轉(zhuǎn)化效率大大提高(100-1000倍);

5 所使用的器皿必須干凈。跡量的去污劑或其它化學物質(zhì)的存在可能大大降低細菌的轉(zhuǎn)化效率;

6 質(zhì)粒的大小及構(gòu)型的影響:用于轉(zhuǎn)化的應(yīng)主要是超螺旋的DNA;顯示在這些負責肝臟/胰腺形成的干細胞上,存在著特殊的細胞膜受體,這些受體可以檢測周圍的前列腺素E2含量,希望能夠?qū)⑵溆糜谡T導多能干細胞iPSC,控制它們向肝細胞或者胰腺細胞分化。iPSC是將對成熟細胞進行重編程形成的,具有與干細胞類似的特性,這樣的方案將能幫助治療那些需要移植肝細胞或者相關(guān)器官受損的患者。

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