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雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒

更新時(shí)間:2016-11-06

簡要描述:

雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得*好評,其立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈,也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn),同時(shí)我們建立了集、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系,有激情、有理想,更有責(zé)任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。

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雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)使用說明書

【產(chǎn)品名稱】
通用名:雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Infectious Bronchitis Virus (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒
【預(yù)期用途】 雞傳染性支氣管炎是由傳染性支氣管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)引起雞的一種急性、高度接觸傳染性呼吸道傳染病,本病呈世界性分布,是嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)的zui主要疫病之一。疫苗免疫是預(yù)防和控制雞傳染性支氣管炎發(fā)生的zui有效途徑,而免疫后抗體水平的高低反映實(shí)際的疫苗免疫效果,直接關(guān)系到免疫雞群對禽流感病毒的抵抗力。
    本試劑盒適用于:雞血清抗體的檢測,以確定被檢雞是否感染過雞傳染性支氣管炎病毒或免疫雞體內(nèi)抗體水平;評估雞群感染IBV的風(fēng)險(xiǎn)程度;了解雛雞母源抗體水平,為IBV免疫程序的制定提供參考。
【原    理】
    本試劑盒系由預(yù)包被雞傳染性支氣管炎病毒重組N蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測雞血清或血漿中雞傳染性支氣管炎病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí),在酶標(biāo)板中加入對照血清和稀釋的待檢血清,經(jīng)溫育后,若樣品中含有雞傳染性支氣管炎病毒的抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)?;用酶?biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有傳染性支氣管炎病毒抗體。
【試劑盒組成】 

序號

名稱

規(guī)格(96T×1)

規(guī)格(96T×2)

1.

酶標(biāo)板

96T×1

96T×2

2.

酶標(biāo)記物  (紅蓋)

11ml×1

11ml×2

3.

抗體工作液 (藍(lán)蓋)

5.5ml×1

11ml×1

4.

20X濃縮洗滌液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白蓋)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑蓋) 

6ml×1

11ml×1

7.

終止液  (黃蓋) 

6ml×1

11ml×1

8.

陽性對照  (紅蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

陰性對照  (綠蓋)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

蓋板膜

1張

2張

11.

自封袋

1個

1個

12.

說明書

1份

1份

 

【儲存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。
【樣品準(zhǔn)備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【檢驗(yàn)方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1.C.O(臨界值)=0.13+陰性對照孔均值(陰性對照孔均值低于0.07時(shí)以0.07計(jì)算)。
2.未曾免疫雞群:樣品A值≥C.O為陽性;樣品A值<C.O為陰性。
3.免疫雞群:監(jiān)測并記錄樣本當(dāng)時(shí)的抗體水平,根據(jù)結(jié)果分析抗體水平的分布及雞群免疫狀態(tài)的動向。
【試驗(yàn)方法的局限性】
    該試驗(yàn)僅作為定性檢測雞血清或血漿中雞傳染性支氣管炎病毒IgG抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評估。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號試劑組分不得混用。

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